تکثیر گردوی ایرانی(juglans regia L.) از طریق کشت بافت

بذور نابالغ گردو از سه واریته ایرانی J3 (خود گشنی مصنوعی)، B21 و ۹۸ (آزاد گرده افشانی شده) یک ماه پس از گرده افشانی هر ۱۰ روز یکبار برداشت شده و پس از مراحل سترون کردن سطحی و تکرار شستشو، شکافته و از اندوسپرم ژلاتینی و قطعات لپه سفید رنگ به عنوان نمونه جدا کشت جهت القای جنین زایی سوماتیکی تولید گیاهچه استفاده شد. قطعات ریشه نهالهای یکساله بذری نیز بدین منظور بکار گرفته شدند. محیط های کشت بکار رفته شامل MS و DKW-c بودند که قطعات لپه روی محیط اخیر تشکیل جنین‌های نابجای سوماتیکی کرده که ابتدا کروی و بعد به اشکال، لپه ای، کلیوی و در نهایت حلزونی در آمدند. این جنین ها مدت ۲ ماه برای برداشته شدن دوره کمون در ˚C 4+ سرمادهی شدند بعد برای تکرار جنین زایی روی محیط پایه (فاقد هورمون و گلوتامین) و برای اندام زایی روی محیط های ویژه هورمونی قرار گرفتند. در جنین های سوماتیکی تشکیل شده،ریشه چه، هیپوکوتیل و طرح برگهای اولیه لپه‌ای زیر میکروسکوپ قابل مشاهده بود. تکرار جنین زایی بیش از ۶ ماه ادامه یافت. قدرت اندام زایی و تولید گیاهچه در سه واریته مورد نظر تا حدودی اختلاف نشان می داد و تفاوت شاخه زایی در واریته J3 بارزتر بود. گیاهان حاصله پس از انتقال به گلدانهای حاوی پیت، پرلیت و ورمیکولیت (۱:۱:۱ حجمی) با همان محیط پایه (DKW-c) ده برابر رقیق شده و بدون ساکارز روزانه آبیاری می شدند. مراحل سازگاری ابتدا با قرار دادن سرپوش شیشه‌ای و بعد پوشش پلاستیکی که بتدریج سوراخ می شد انجام گرفت. نمونه های اندوسپرم و ریشه با وجود توان افزایش حجم و تشکیل کالوس تنها پس از چند هفته قهوه‌ای شده و از بین رفتند. علاوه بر اندام زایی روی جنین های سوماتیکی شکلهای دیگر اندام زایی، مستقیم روی قطعات لپه یا با واسطه کالوس و تولید جنین های نابجا روی توده های بافت قهوه‌ای خارج شده از جنین های سوماتیکی هیپروتروفیک شده قبلی، چند جنینی و شکلهای غیر طبیعی روی نمونه ها ظاهر شدند. بارزترین حالت ایجاد شده شاخه زایی شدید روی قطعات کالوس بود. محدوده تغییرات برای محیط کشت kin بین ppm 20-1/0 و برای محیط کشت IBA بین ppm 5-01/0 بود. بهترین ترکیب هورمونی برای ریشه زا IBA/K=4/1.5و برای شاخه زایی ppm 10/0.1 =IBA/K تعیین شد. Micropropagation of Persian walnut(juglans regia L.) Abstract: Unmaturated seeds from three cutivars of Persian walnut (juglans regia L.) were culected on ten days hnterval one month after polination. Following surface sterlization and repeated washing, gelatinus endosperm and wight cotiledon fragments were used as expelants on the MS and DKW-c media for induction of somatic emberyogenesis and plantlet production. Cotiledon explant on DKW-c medium formed somatic emberyos which wre globular at the beginning,then became bean-like and finally helical. Plantlets from the somatic emberyos were transferred into a mixture of peat, perlite, vermiculite (1:1:1v/v) under unsterhle conditionand fed with 1/10 dilutionof the same medium (excluding sucrose) everyday.

مولف: محسن نصیری

دانلود نسخه PDF